美伊二次和谈前夕，局势突发变数，美军的挑衅彻底打破了谈判前的平静。4月19日晚间，美国谈判代表团刚抵达伊斯兰堡，美军便在阿拉伯海北部对一艘伊朗集装箱船发动精准空袭，摧毁其动力系统后强行登船扣押。面对美军的挑衅，伊朗迅速反击，对美军发动无人机攻击，双方剑拔弩张，和谈前景瞬间蒙上阴影。
美军此举并非偶然，核心目的有二：一是通过扣押伊朗货船，增加谈判桌上的筹码；二是借机打压伊朗革命卫队的气势，试图在谈判前掌握主动权。而伊朗内部的分裂，更是让局势雪上加霜。伊朗主和派与主战派分歧公开化，主和派愿主动让步换取和谈突破，主战派则坚决反对妥协，双方在霍尔木兹海峡开放问题上的对立的尤为明显，甚至出现前脚宣布开放、后脚重新封锁的局面。哈梅内伊离世后，伊朗再无权威力量调和两派矛盾，内部分裂进一步加剧，也让美伊和谈陷入两难境地。